V predchádzajúcom projekte testujúcom miestne závody na spracovanie potravín pre komáre v Thajsku sa zistilo, že esenciálne oleje (EO) Cyperus rotundus, galangal a škorica majú dobrú aktivitu proti komárom proti Aedes aegypti.V snahe obmedziť používanie tradičnýchinsekticídya zlepšiť kontrolu rezistentných populácií komárov, táto štúdia sa zamerala na identifikáciu potenciálneho synergizmu medzi dospelými účinkami etylénoxidu a toxicitou permetrínu na komáre rodu Aedes.aegypti, vrátane kmeňov odolných voči pyretroidom a citlivých kmeňov.
Vyhodnotiť chemické zloženie a ničiacu aktivitu EO extrahovaného z odnoží C. rotundus a A. galanga a kôry C. verum proti citlivému kmeňu Muang Chiang Mai (MCM-S) a rezistentnému kmeňu Pang Mai Dang (PMD-R ).) Dospelý aktívny Ae.Aedes aegypti.Na týchto komároch rodu Aedes sa tiež vykonal biologický test zmesi EO-permetrínu pre dospelých, aby sa pochopila jeho synergická aktivita.aegyptské kmene.
Chemická charakterizácia pomocou analytickej metódy GC-MS ukázala, že z EO C. rotundus, A. galanga a C. verum bolo identifikovaných 48 zlúčenín, čo predstavuje 80,22 %, 86,75 % a 97,24 % z celkových zložiek.Cyperén (14,04 %), β-bisabolén (18,27 %) a cinnamaldehyd (64,66 %) sú hlavnými zložkami cyperského oleja, galangalového oleja a balzamikového oleja.V biologických testoch usmrcovania dospelých jedincov boli C. rotundus, A. galanga a C. verum EV účinné pri usmrcovaní Ae.Hodnoty aegypti, MCM-S a PMD-R LD50 boli 10,05 a 9,57 μg/mg u žien, 7,97 a 7,94 μg/mg u žien a 3,30 a 3,22 μg/mg u žien.Účinnosť MCM-S a PMD-R Ae pri zabíjaní dospelých jedincov.aegypti v týchto EO bol blízky piperonylbutoxidu (hodnoty PBO, LD50 = 6,30 a 4,79 μg/mg samice), ale nie taký výrazný ako permetrín (hodnoty LD50 = 0,44 a 3,70 ng/mg samice).Kombinované biologické testy však našli synergiu medzi EO a permetrínom.Významný synergizmus s permetrínom proti dvom kmeňom komárov rodu Aedes.Aedes aegypti bol zaznamenaný v EM C. rotundus a A. galanga.Pridanie olejov C. rotundus a A. galanga významne znížilo hodnoty LD50 permetrínu na MCM-S z 0,44 na 0,07 ng/mg a 0,11 ng/mg u žien, v uvedenom poradí, s hodnotami synergického pomeru (SR). 6,28 a 4,00.Okrem toho EO C. rotundus a A. galanga tiež významne znížili hodnoty LD50 permetrínu na PMD-R z 3,70 na 0,42 ng/mg a 0,003 ng/mg u žien, s hodnotami SR 8,81 resp. 1233,33, resp..
Synergický účinok kombinácie EO-permetrínu na zvýšenie toxicity pre dospelých proti dvom kmeňom komárov Aedes.Aedes aegypti demonštruje sľubnú úlohu etylénoxidu ako synergistu pri zvyšovaní účinnosti proti komárom, najmä tam, kde sú tradičné zlúčeniny neúčinné alebo nevhodné.
Komár Aedes aegypti (Diptera: Culicidae) je hlavným prenášačom horúčky dengue a iných infekčných vírusových ochorení, ako je žltá zimnica, chikungunya a vírus Zika, ktoré predstavujú obrovskú a pretrvávajúcu hrozbu pre ľudí[1, 2]..Vírus dengue je najzávažnejšou patogénnou hemoragickou horúčkou postihujúcou ľudí, pričom sa odhaduje, že ročne sa vyskytne 5 až 100 miliónov prípadov a viac ako 2,5 miliardy ľudí na celom svete je ohrozených [3].Prepuknutie tejto infekčnej choroby predstavuje obrovskú záťaž pre obyvateľstvo, zdravotné systémy a ekonomiky väčšiny tropických krajín [1].Podľa thajského ministerstva zdravotníctva bolo v roku 2015 celoštátne hlásených 142 925 prípadov horúčky dengue a 141 úmrtí, čo je viac ako trojnásobok počtu prípadov a úmrtí v roku 2014 [4].Napriek historickým dôkazom bola horúčka dengue eradikovaná alebo výrazne znížená komárom Aedes.Po kontrole Aedes aegypti [5] sa miera infekcie dramaticky zvýšila a choroba sa rozšírila po celom svete, čiastočne v dôsledku desaťročí globálneho otepľovania.Eliminácia a kontrola Ae.Aedes aegypti je pomerne náročný, pretože je to domáci prenášač komárov, ktorý sa počas dňa pári, kŕmi, odpočíva a kladie vajíčka do ľudských obydlí a okolo nich.Okrem toho má tento komár schopnosť prispôsobiť sa zmenám alebo poruchám prostredia spôsobeným prírodnými udalosťami (ako je sucho) alebo ľudskými kontrolnými opatreniami a môže sa vrátiť k pôvodným počtom [6, 7].Pretože vakcíny proti horúčke dengue boli schválené len nedávno a neexistuje žiadna špecifická liečba horúčky dengue, prevencia a znižovanie rizika prenosu horúčky dengue úplne závisí od kontroly prenášačov komárov a vylúčenia ľudského kontaktu s prenášačmi.
Najmä používanie chemikálií na kontrolu komárov teraz zohráva dôležitú úlohu vo verejnom zdraví ako dôležitá súčasť komplexného integrovaného manažmentu vektorov.Medzi najpopulárnejšie chemické metódy patrí použitie málo toxických insekticídov, ktoré pôsobia proti larvám komárov (larvicídy) a dospelým komárom (adidocídy).Za dôležitú sa považuje kontrola lariev prostredníctvom redukcie zdrojov a pravidelného používania chemických larvicídov, ako sú organofosfáty a regulátory rastu hmyzu.Hlavným problémom však zostávajú nepriaznivé environmentálne vplyvy spojené so syntetickými pesticídmi a ich náročnou a zložitou údržbou [8, 9].Tradičná aktívna kontrola vektorov, ako je kontrola dospelých jedincov, zostáva najefektívnejším prostriedkom kontroly počas prepuknutia vírusov, pretože môže rýchlo a vo veľkom rozsahu eradikovať vektory infekčných chorôb, ako aj znížiť životnosť a životnosť miestnych populácií vektorov [3].10].Štyri triedy chemických insekticídov: organochlórové látky (označované len ako DDT), organofosfáty, karbamáty a pyretroidy tvoria základ programov na kontrolu vektorov, pričom pyretroidy sa považujú za najúspešnejšiu triedu.Sú vysoko účinné proti rôznym článkonožcom a majú nízku účinnosť.toxicita pre cicavce.V súčasnosti tvoria väčšinu komerčných pesticídov syntetické pyretroidy, ktoré predstavujú asi 25 % celosvetového trhu s pesticídmi [11, 12].Permetrín a deltametrín sú širokospektrálne pyretroidné insekticídy, ktoré sa už desaťročia používajú na celom svete na kontrolu rôznych škodcov poľnohospodárskeho a medicínskeho významu [13, 14].V 50. rokoch 20. storočia bol DDT vybraný ako chemikália pre thajský národný program na kontrolu komárov v oblasti verejného zdravia.Po rozšírenom používaní DDT v oblastiach s endemickou maláriou Thajsko v rokoch 1995 až 2000 postupne upustilo od používania DDT a nahradilo ho dvoma pyretroidmi: permetrínom a deltametrínom [15, 16].Tieto pyretroidné insekticídy boli zavedené na začiatku 90-tych rokov minulého storočia na kontrolu malárie a horúčky dengue, predovšetkým prostredníctvom ošetrenia sieťkou na posteli a použitím tepelnej hmly a sprejov s ultranízkou toxicitou [14, 17].Stratili však účinnosť v dôsledku silnej odolnosti proti komárom a nedostatočného dodržiavania predpisov zo strany verejnosti v dôsledku obáv o verejné zdravie a vplyv syntetických chemikálií na životné prostredie.To predstavuje významné výzvy pre úspech programov na kontrolu vektorov hrozieb [14, 18, 19].Aby bola stratégia efektívnejšia, sú potrebné včasné a vhodné protiopatrenia.Odporúčané postupy manažmentu zahŕňajú nahrádzanie prírodných látok, striedanie chemikálií rôznych tried, pridávanie synergentov a miešanie chemikálií alebo súčasnú aplikáciu chemikálií rôznych tried [14, 20, 21].Preto existuje naliehavá potreba nájsť a vyvinúť ekologickú, pohodlnú a efektívnu alternatívu a synergistu a táto štúdia sa zameriava na riešenie tejto potreby.
Prirodzene odvodené insekticídy, najmä tie, ktoré sú založené na rastlinných zložkách, preukázali potenciál pri hodnotení súčasných a budúcich alternatív kontroly komárov [22, 23, 24].Niekoľko štúdií ukázalo, že je možné kontrolovať dôležité prenášače komárov pomocou rastlinných produktov, najmä esenciálnych olejov (EO), ako zabijakov dospelých.Adulticídne vlastnosti proti niektorým dôležitým druhom komárov boli nájdené v mnohých rastlinných olejoch, ako je zeler, rasca, zedoaria, aníz, fajka, tymián, Schinus terebinthifolia, Cymbopogon citratus, Cymbopogon schoenanthus, Cymbopogon giganteus, Chenopodium ambrosiides, Cochonisornisimu teretic planeticsum. ., Eucalyptus citriodora, Cananga odorata a Petroselinum Criscum [25,26,27,28,29,30].Etylénoxid sa dnes používa nielen samostatne, ale aj v kombinácii s extrahovanými rastlinnými látkami alebo existujúcimi syntetickými pesticídmi, ktoré spôsobujú rôzne stupne toxicity.Kombinácie tradičných insekticídov, ako sú organofosfáty, karbamáty a pyretroidy s etylénoxidom/rastlinnými extraktmi pôsobia synergicky alebo antagonisticky vo svojich toxických účinkoch a ukázali sa ako účinné proti prenášačom chorôb a škodcom [31,32,33,34,35].Väčšina štúdií o synergických toxických účinkoch kombinácií fytochemikálií so syntetickými chemikáliami alebo bez nich sa však uskutočnila na poľnohospodárskych hmyzích vektoroch a škodcoch, a nie na medicínsky dôležitých komároch.Okrem toho sa väčšina prác na synergických účinkoch kombinácií rastlinno-syntetických insekticídov proti vektorom komárov zamerala na larvicídny účinok.
V predchádzajúcej štúdii vykonanej autormi ako súčasť prebiehajúceho výskumného projektu skríningu intimicídov z pôvodných potravinárskych rastlín v Thajsku sa zistilo, že etylénoxidy z Cyperus rotundus, galangal a škorica majú potenciálnu aktivitu proti dospelým Aedes.Egypt [36].Preto sa táto štúdia zamerala na vyhodnotenie účinnosti EO izolovaných z týchto liečivých rastlín proti komárom rodu Aedes.aegypti, vrátane kmeňov odolných voči pyretroidom a citlivých kmeňov.Analyzoval sa aj synergický efekt binárnych zmesí etylénoxidu a syntetických pyretroidov s dobrou účinnosťou u dospelých, aby sa znížilo používanie tradičných insekticídov a zvýšila sa odolnosť voči prenášačom komárov, najmä proti Aedes.Aedes aegypti.Tento článok uvádza chemickú charakterizáciu účinných esenciálnych olejov a ich potenciál zvýšiť toxicitu syntetického permetrínu proti komárom rodu Aedes.aegypti v kmeňoch citlivých na pyretroidy (MCM-S) a rezistentných kmeňoch (PMD-R).
Oddenky C. rotundus a A. galanga a kôra C. verum (obr. 1) používané na extrakciu esenciálneho oleja boli zakúpené od dodávateľov bylinnej medicíny v provincii Chiang Mai v Thajsku.Vedecká identifikácia týchto rastlín bola dosiahnutá prostredníctvom konzultácie s pánom Jamesom Franklinom Maxwellom, herbárovým botanikom, Katedra biológie, College of Science, Chiang Mai University (CMU), provincia Chiang Mai, Thajsko a vedcom Wannari Charoensap;na Katedre farmácie, College of Pharmacy, Carnegie Mellon University, sú vzorky pani Voucher každej rastliny uložené na oddelení parazitológie na Carnegie Mellon University School of Medicine pre budúce použitie.
Vzorky rastlín boli individuálne sušené v tieni počas 3–5 dní na otvorenom priestranstve s aktívnym vetraním a okolitou teplotou približne 30 ± 5 °C, aby sa odstránil obsah vlhkosti pred extrakciou prírodných éterických olejov (EO).Celkom 250 g každého suchého rastlinného materiálu sa mechanicky rozomlelo na hrubý prášok a použilo sa na izoláciu éterických olejov (EO) destiláciou vodnou parou.Destilačný prístroj pozostával z elektrického vykurovacieho plášťa, 3000 ml banky s guľatým dnom, extrakčnej kolóny, chladiča a zariadenia Cool ace (Eyela Cool Ace CA-1112 CE, Tokyo Rikakikai Co. Ltd., Tokio, Japonsko) .Do banky pridajte 1600 ml destilovanej vody a 10 – 15 sklenených guľôčok a potom ju zahrievajte na približne 100 °C pomocou elektrického ohrievača najmenej 3 hodiny, kým sa destilácia nedokončí a nevznikne žiadny ďalší EO.EO vrstva sa oddelila od vodnej fázy pomocou oddeľovacieho lievika, vysušila sa nad bezvodým síranom sodným (Na2S04) a skladovala sa v uzavretej hnedej fľaši pri 4 °C, kým sa neskúmalo chemické zloženie a aktivita dospelých jedincov.
Chemické zloženie esenciálnych olejov sa uskutočňovalo súčasne s biologickým testom na látku pre dospelých.Kvalitatívna analýza sa uskutočnila pomocou systému GC-MS pozostávajúceho z plynového chromatografu Hewlett-Packard (Wilmington, CA, USA) 7890A vybaveného jedným kvadrupólovým hmotnostným selektívnym detektorom (Agilent Technologies, Wilmington, CA, USA) a MSD 5975C (EI ).(Agilent Technologies).
Chromatografická kolóna – DB-5MS (30 m × ID 0,25 mm × hrúbka filmu 0,25 µm).Celkový čas GC-MS bol 20 minút.Podmienky analýzy sú také, že teplota vstrekovača a prenosového potrubia je 250 °C a 280 °C;teplota pece je nastavená tak, aby sa zvyšovala z 50 °C na 250 °C rýchlosťou 10 °C/min, nosným plynom je hélium;prietok 1,0 ml/min;injekčný objem je 0,2 ul (1/10 % objemu v CH2CI2, deliaci pomer 100:1);Na detekciu GC-MS sa používa elektrónový ionizačný systém s ionizačnou energiou 70 eV.Rozsah snímania je 50–550 jednotiek atómovej hmotnosti (amu) a rýchlosť skenovania je 2,91 skenov za sekundu.Relatívne percentá zložiek sú vyjadrené ako percentá normalizované podľa plochy píku.Identifikácia zložiek EO je založená na ich retenčnom indexe (RI).RI sa vypočítalo pomocou rovnice Van den Doola a Kratza [37] pre sériu n-alkánov (C8-C40) a porovnalo sa s retenčnými indexmi z literatúry [38] a databáz knižníc (NIST 2008 a Wiley 8NO8).Identita zobrazených zlúčenín, ako je štruktúra a molekulový vzorec, bola potvrdená porovnaním s dostupnými autentickými vzorkami.
Analytické štandardy pre syntetický permetrín a piperonylbutoxid (PBO, pozitívna kontrola v synergických štúdiách) boli zakúpené od Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, USA).Testovacie súpravy pre dospelých Svetovej zdravotníckej organizácie (WHO) a diagnostické dávky papiera impregnovaného permetrínom (0,75 %) boli komerčne zakúpené od WHO Vector Control Center v Penangu v Malajzii.Všetky ostatné použité chemikálie a činidlá boli analytickej kvality a boli zakúpené od miestnych inštitúcií v provincii Chiang Mai v Thajsku.
Komáre použité ako testovacie organizmy v biologickom teste pre dospelých boli voľne páriace laboratórne komáre rodu Aedes.aegypti, vrátane citlivého kmeňa Muang Chiang Mai (MCM-S) a rezistentného kmeňa Pang Mai Dang (PMD-R).Kmeň MCM-S sa získal z miestnych vzoriek odobratých v oblasti Muang Chiang Mai, provincia Chiang Mai, Thajsko a od roku 1995 sa udržiaval v entomologickej miestnosti oddelenia parazitológie lekárskej fakulty CMU [39].Kmeň PMD-R, o ktorom sa zistilo, že je odolný voči permetrínu, bol izolovaný z poľných komárov pôvodne zozbieraných z Ban Pang Mai Dang, okres Mae Tang, provincia Chiang Mai, Thajsko a od roku 1997 sa udržiava v tom istom inštitúte [40 ].Kmene PMD-R boli pestované pod selektívnym tlakom na udržanie úrovne rezistencie prerušovaným vystavením 0,75 % permetrínu pomocou detekčnej súpravy WHO s určitými úpravami [41].Každý kmeň Ae.Aedes aegypti bol kolonizovaný individuálne v laboratóriu bez patogénov pri 25 ± 2 ° C a 80 ± 10 % relatívnej vlhkosti a 14:10 h fotoperióde svetlo/tma.Približne 200 lariev bolo chovaných v plastových podnosoch (33 cm dlhé, 28 cm široké a 9 cm vysoké) naplnených vodou z vodovodu v hustote 150 – 200 lariev na podnos a kŕmené dvakrát denne sterilizovanými psími sušienkami.Dospelé červy boli držané vo vlhkých klietkach a kontinuálne kŕmené 10% vodným roztokom sacharózy a 10% roztokom multivitamínového sirupu.Samičky komárov pravidelne sajú krv, aby nakladali vajíčka.Samice staré dva až päť dní, ktoré neboli kŕmené krvou, sa môžu nepretržite používať v experimentálnych biologických testoch u dospelých.
Na dospelých samičkách komárov rodu Aedes sa uskutočnil biologický test odozvy na dávku EO.aegypti, MCM-S a PMD-R pomocou lokálnej metódy upravenej podľa štandardného protokolu WHO na testovanie citlivosti [42].EO z každej rastliny sa sériovo riedil vhodným rozpúšťadlom (napr. etanolom alebo acetónom), aby sa získala odstupňovaná séria 4-6 koncentrácií.Po anestézii oxidom uhličitým (CO2) boli komáre individuálne odvážené.Anestetizované komáre sa potom udržiavali bez pohybu na suchom filtračnom papieri na vlastnej studenej platni pod stereomikroskopom, aby sa zabránilo reaktivácii počas postupu.Pri každom ošetrení sa 0,1 μl roztoku EO aplikovalo do horného pronota ženy pomocou ručného mikrodávkovača Hamilton (700 Series Microliter™, Hamilton Company, Reno, NV, USA).Každou koncentráciou bolo liečených 25 samíc, pričom mortalita sa pohybovala od 10 % do 95 % pre najmenej 4 rôzne koncentrácie.Ako kontrola slúžili komáre ošetrené rozpúšťadlom.Aby sa zabránilo kontaminácii skúšobných vzoriek, vymeňte filtračný papier za nový filtračný papier pre každý testovaný EO.Dávky použité v týchto biologických testoch sú vyjadrené v mikrogramoch EO na miligram živej telesnej hmotnosti ženy.Aktivita PBO u dospelých sa tiež hodnotila podobným spôsobom ako EO, pričom PBO sa použil ako pozitívna kontrola v synergických experimentoch.Ošetrené komáre vo všetkých skupinách boli umiestnené do plastových pohárov a dostali 10% sacharózu plus 10% multivitamínový sirup.Všetky biologické testy sa uskutočňovali pri 25 ± 2 °C a 80 ± 10 % relatívnej vlhkosti a opakovali sa štyrikrát s kontrolami.Úmrtnosť počas 24-hodinového obdobia odchovu bola kontrolovaná a potvrdená nedostatočnou reakciou komára na mechanickú stimuláciu a potom zaznamenaná na základe priemeru štyroch opakovaní.Experimentálne ošetrenie sa opakovalo štyrikrát pre každú testovanú vzorku s použitím rôznych šarží komárov.Výsledky sa zhrnuli a použili na výpočet percentuálnej miery úmrtnosti, ktorá sa použila na stanovenie 24-hodinovej letálnej dávky probitovou analýzou.
Synergický anticídny účinok EO a permetrínu sa hodnotil použitím postupu lokálneho testu toxicity [42], ako už bolo opísané.Na prípravu permetrínu v požadovanej koncentrácii použite acetón alebo etanol ako rozpúšťadlo, ako aj binárnu zmes EO a permetrínu (EO-permetrín: permetrín zmiešaný s EO v koncentrácii LD25).Testovacie súpravy (permetrín a EO-permetrín) sa hodnotili proti kmeňom Ae MCM-S a PMD-R.Aedes aegypti.Každá z 25 samíc komárov dostala štyri dávky permetrínu, aby sa otestovala jeho účinnosť pri zabíjaní dospelých, pričom každá liečba sa opakovala štyrikrát.Na identifikáciu kandidátskych EO synergistov bolo podaných 4 až 6 dávok EO-permetrínu každej z 25 samíc komárov, pričom každá aplikácia sa opakovala štyrikrát.Liečba PBO-permetrínom (permetrín zmiešaný s koncentráciou LD25 PBO) tiež slúžila ako pozitívna kontrola.Dávky použité v týchto biologických testoch sú vyjadrené v nanogramoch testovanej vzorky na miligram živej telesnej hmotnosti ženy.Boli uskutočnené štyri experimentálne hodnotenia pre každý kmeň komárov na individuálne chovaných dávkach a údaje o úmrtnosti boli zlúčené a analyzované pomocou Probit na určenie 24-hodinovej smrteľnej dávky.
Úmrtnosť bola upravená pomocou Abbottovho vzorca [43].Upravené údaje sa analyzovali pomocou regresnej analýzy Probit pomocou počítačového štatistického programu SPSS (verzia 19.0).Smrteľné hodnoty 25 %, 50 %, 90 %, 95 % a 99 % (LD25, LD50, LD90, LD95 a LD99, v tomto poradí) sa vypočítali pomocou zodpovedajúcich 95 % intervalov spoľahlivosti (95 % CI).Merania významnosti a rozdielov medzi testovanými vzorkami boli hodnotené pomocou chí-kvadrát testu alebo Mann-Whitney U testu v rámci každého biologického testu.Výsledky sa považovali za štatisticky významné na P< 0,05.Koeficient odporu (RR) sa odhaduje na úrovni LD50 pomocou nasledujúceho vzorca [12]:
RR > 1 znamená odpor a RR ≤ 1 znamená citlivosť.Hodnota synergického pomeru (SR) každého kandidáta na synergiu sa vypočíta takto [34, 35, 44]:
Tento faktor rozdeľuje výsledky do troch kategórií: hodnota SR 1 ± 0,05 sa považuje za bez zjavného účinku, hodnota SR > 1,05 sa považuje za synergický účinok a hodnota SR svetložltého tekutého oleja môže byť získaný parnou destiláciou odnoží C. rotundus a A. galanga a kôry C. verum.Výťažky vypočítané na suchú hmotnosť boli 0,15 %, 0,27 % (hmotn./hmotn.) a 0,54 % (obj./obj.).w) v uvedenom poradí (tabuľka 1).GC-MS štúdia chemického zloženia olejov C. rotundus, A. galanga a C. verum preukázala prítomnosť 19, 17 a 21 zlúčenín, ktoré tvorili 80,22, 86,75 a 97,24 % všetkých zložiek (tabuľka 2 ).Olejové zlúčeniny C. lucidum rhizome sa skladajú hlavne z cyperonenu (14,04 %), po ktorom nasleduje karralén (9,57 %), a-kapselan (7,97 %) a a-kapselan (7,53 %).Hlavnou chemickou zložkou oleja z podzemkov galangu je β-bisabolén (18,27 %), po ňom nasleduje α-bergamotén (16,28 %), 1,8-cineol (10,17 %) a piperonol (10,09 %).Zatiaľ čo cinnamaldehyd (64,66 %) bol identifikovaný ako hlavná zložka oleja z kôry C. verum, octan škoricový (6,61 %), α-kopaén (5,83 %) a 3-fenylpropiónaldehyd (4,09 %) boli považované za vedľajšie zložky.Chemické štruktúry cypernu, β-bisabolénu a cinnamaldehydu sú hlavné zlúčeniny C. rotundus, A. galanga a C. verum, v tomto poradí, ako je znázornené na obrázku 2.
Výsledky od troch OO hodnotili aktivitu dospelých proti komárom Aedes.komáre aegypti sú uvedené v tabuľke 3. Zistilo sa, že všetky EO majú smrteľné účinky na komáre MCM-S Aedes v rôznych typoch a dávkach.Aedes aegypti.Najúčinnejším EO je C. verum, po ktorom nasledujú A. galanga a C. rotundus s hodnotami LD50 3,30, 7,97 a 10,05 μg/mg MCM-S samíc, o niečo viac ako 3,22 (U = 1 ), Z = -0,775, P = 0,667), 7,94 (U = 2, Z = 0, P = 1) a 9,57 (U = 0, Z = -1,549, P = 0,333) μg/mg PMD-R u žien.To zodpovedá tomu, že PBO má mierne vyšší účinok na PMD-R u dospelých ako kmeň MSM-S, s hodnotami LD50 4,79 a 6,30 μg/mg u žien (U = 0, Z = -2,021, P = 0,057) .).Dá sa vypočítať, že hodnoty LD50 C. verum, A. galanga, C. rotundus a PBO proti PMD-R sú približne 0,98, 0,99, 0,95 a 0,76 krát nižšie ako hodnoty proti MCM-S.To teda naznačuje, že citlivosť na PBO a EO je medzi dvoma kmeňmi Aedes relatívne podobná.Hoci PMD-R bola citlivejšia ako MCM-S, citlivosť Aedes aegypti nebola významná.Na rozdiel od toho sa dva kmene Aedes značne líšili vo svojej citlivosti na permetrín.aegypti (tabuľka 4).PMD-R preukázala významnú rezistenciu voči permetrínu (hodnota LD50 = 0,44 ng/mg u žien) s vyššou hodnotou LD50 3,70 v porovnaní s MCM-S (hodnota LD50 = 0,44 ng/mg u žien) ng/mg u žien (U = 0, Z = -2,309, P = 0,029).Hoci PMD-R je oveľa menej citlivý na permetrín ako MCM-S, jeho citlivosť na oleje PBO a C. verum, A. galanga a C. rotundus je o niečo vyššia ako MCM-S.
Ako bolo pozorované v biologickom teste dospelej populácie kombinácie EO-permetrín, binárne zmesi permetrínu a EO (LD25) vykazovali buď synergiu (hodnota SR > 1,05) alebo žiadny účinok (hodnota SR = 1 ± 0,05).Komplexné účinky zmesi EO-permetrínu pre dospelých na experimentálne albínske komáre.Kmene Aedes aegypti MCM-S a PMD-R sú uvedené v tabuľke 4 a na obrázku 3. Zistilo sa, že pridanie oleja C. verum mierne znižuje LD50 permetrínu proti MCM-S a mierne zvyšuje LD50 proti PMD-R na 0,44– 0,42 ng/mg u žien a od 3,70 do 3,85 ng/mg u žien.Na rozdiel od toho pridanie olejov C. rotundus a A. galanga významne znížilo LD50 permetrínu na MCM-S z 0,44 na 0,07 (U = 0, Z = -2,309, P = 0,029) a na 0,11 (U = 0)., Z) = -2,309, P = 0,029) ng/mg žien.Na základe hodnôt LD50 MCM-S boli SR hodnoty zmesi EO-permetrínu po pridaní olejov C. rotundus a A. galanga 6,28 a 4,00.V súlade s tým sa LD50 permetrínu proti PMD-R významne znížilo z 3,70 na 0,42 (U = 0, Z = -2,309, P = 0,029) a na 0,003 s pridaním olejov C. rotundus a A. galanga (U = 0 ). .Z = -2,337, P = 0,029) ng/mg samice.SR hodnota permetrínu v kombinácii s C. rotundus proti PMD-R bola 8,81, kým SR hodnota zmesi galangal-permetrín bola 1233,33.V porovnaní s MCM-S sa hodnota LD50 pozitívnej kontroly PBO znížila z 0,44 na 0,26 ng/mg (ženy) a z 3,70 ng/mg (ženy) na 0,65 ng/mg (U = 0, Z = -2,309, P = 0,029) a PMD-R (U = 0, Z = -2,309, P = 0,029).Hodnoty SR zmesi PBO-permetrínu pre kmene MCM-S a PMD-R boli 1,69 a 5,69.Tieto výsledky naznačujú, že oleje C. rotundus a A. galanga a PBO zvyšujú toxicitu permetrínu vo väčšej miere ako olej C. verum pre kmene MCM-S a PMD-R.
Aktivita dospelých (LD50) EO, PBO, permetrínu (PE) a ich kombinácií proti kmeňom komárov rodu Aedes citlivých na pyretroidy (MCM-S) a rezistentným (PMD-R).Aedes aegypti
[45].Syntetické pyretroidy sa celosvetovo používajú na kontrolu takmer všetkých článkonožcov poľnohospodárskeho a medicínskeho významu.Z dôvodu škodlivých dôsledkov používania syntetických insekticídov, najmä z hľadiska vývoja a rozšírenej odolnosti komárov, ako aj vplyvu na dlhodobé zdravie a životné prostredie, je však v súčasnosti naliehavo potrebné obmedziť používanie tradičných syntetických insekticídov a vyvinúť alternatívy [35, 46, 47].Okrem ochrany životného prostredia a ľudského zdravia medzi výhody botanických insekticídov patrí vysoká selektivita, globálna dostupnosť a jednoduchosť výroby a použitia, vďaka čomu sú atraktívnejšie na kontrolu komárov [32,48, 49].Táto štúdia okrem objasnenia chemických vlastností účinných esenciálnych olejov prostredníctvom analýzy GC-MS hodnotila aj účinnosť esenciálnych olejov pre dospelých a ich schopnosť zvyšovať toxicitu syntetického permetrínu.aegypti v kmeňoch citlivých na pyretroidy (MCM-S) a rezistentných kmeňoch (PMD-R).
GC-MS charakterizácia ukázala, že cypern (14,04 %), β-bisabolén (18,27 %) a cinnamaldehyd (64,66 %) boli hlavnými zložkami olejov C. rotundus, A. galanga a C. verum.Tieto chemikálie preukázali rôzne biologické aktivity.Ahn a kol.[50] uviedli, že 6-acetoxycyperén, izolovaný z podzemku C. rotundus, pôsobí ako protinádorová zlúčenina a môže indukovať apoptózu závislú od kaspázy v bunkách rakoviny vaječníkov.β-Bisabolén, extrahovaný z esenciálneho oleja myrhového stromu, vykazuje špecifickú cytotoxicitu voči ľudským a myším bunkám prsného nádoru in vitro aj in vivo [51].Cinnamaldehyd, získaný z prírodných extraktov alebo syntetizovaný v laboratóriu, má insekticídne, antibakteriálne, antifungálne, protizápalové, imunomodulačné, protirakovinové a antiangiogénne účinky [52].
Výsledky biologického testu aktivity dospelých v závislosti od dávky ukázali dobrý potenciál testovaných EO a ukázali, že kmene komárov Aedes MCM-S a PMD-R mali podobnú citlivosť na EO a PBO.Aedes aegypti.Porovnanie účinnosti EO a permetrínu ukázalo, že permetrín má silnejší alercídny účinok: hodnoty LD50 sú 0,44 a 3,70 ng/mg u žien pre kmene MCM-S a PMD-R.Tieto zistenia sú podporené mnohými štúdiami, ktoré ukazujú, že prirodzene sa vyskytujúce pesticídy, najmä produkty rastlinného pôvodu, sú vo všeobecnosti menej účinné ako syntetické látky [31, 34, 35, 53, 54].To môže byť spôsobené tým, že prvá je komplexná kombinácia aktívnych alebo neaktívnych zložiek, zatiaľ čo druhá je purifikovaná jediná aktívna zlúčenina.Rozmanitosť a komplexnosť prírodných účinných látok s rôznymi mechanizmami účinku však môže zvýšiť biologickú aktivitu alebo brániť rozvoju rezistencie v hostiteľských populáciách [55, 56, 57].Mnoho výskumníkov uviedlo potenciál C. verum, A. galanga a C. rotundus proti komárom a ich zložiek, ako je β-bisabolén, cinnamaldehyd a 1,8-cineol [22, 36, 58, 59, 60,61, 62,63,64].Prehľad literatúry však odhalil, že neexistujú žiadne predchádzajúce správy o jeho synergickom účinku s permetrínom alebo inými syntetickými insekticídmi proti komárom rodu Aedes.Aedes aegypti.
V tejto štúdii boli pozorované významné rozdiely v citlivosti na permetrín medzi dvoma kmeňmi Aedes.Aedes aegypti.MCM-S je citlivý na permetrín, zatiaľ čo PMD-R je naň oveľa menej citlivý, s mierou rezistencie 8,41.V porovnaní s citlivosťou MCM-S je PMD-R menej citlivý na permetrín, ale citlivejší na EO, čo poskytuje základ pre ďalšie štúdie zamerané na zvýšenie účinnosti permetrínu jeho kombináciou s EO.Synergický kombinovaný biotest na účinky u dospelých ukázal, že binárne zmesi EO a permetrínu znížili alebo zvýšili mortalitu dospelých Aedes.Aedes aegypti.Pridanie oleja C. verum mierne znížilo LD50 permetrínu proti MCM-S, ale mierne zvýšilo LD50 proti PMD-R s hodnotami SR 1,05 a 0,96.To naznačuje, že olej C. verum nemá synergický alebo antagonistický účinok na permetrín, keď sa testuje na MCM-S a PMD-R.Na rozdiel od toho oleje C. rotundus a A. galanga vykazovali významný synergický účinok tým, že významne znížili hodnoty LD50 permetrínu na MCM-S alebo PMD-R.Keď bol permetrín kombinovaný s EO C. rotundus a A. galanga, SR hodnoty zmesi EO-permetrínu pre MCM-S boli 6,28 a 4,00.Okrem toho, keď bol permetrín hodnotený voči PMD-R v kombinácii s C. rotundus (SR = 8,81) alebo A. galanga (SR = 1233,33), hodnoty SR sa významne zvýšili.Stojí za zmienku, že C. rotundus aj A. galanga zvýšili toxicitu permetrínu proti PMD-R Ae.aegypti výrazne.Podobne sa zistilo, že PBO zvyšuje toxicitu permetrínu s hodnotami SR 1,69 a 5,69 pre kmene MCM-S a PMD-R.Keďže C. rotundus a A. galanga mali najvyššie hodnoty SR, považovali sa za najlepších synergistov pri zvyšovaní permetrínovej toxicity na MCM-S a PMD-R, v tomto poradí.
Niekoľko predchádzajúcich štúdií uvádza synergický účinok kombinácií syntetických insekticídov a rastlinných extraktov proti rôznym druhom komárov.Laricídny biotest proti Anopheles Stephensi, ktorý študovali Kalayanasundaram a Das [65], ukázal, že fention, širokospektrálny organofosfát, je spojený s Cleodendron inerme, Pedalium murax a Parthenium hysterophorus.Medzi extraktmi bola pozorovaná významná synergia so synergickým účinkom (SF) 1,31.1,38, 1,40, 1,48, 1,61 a 2,23, v tomto poradí.Pri larvicídnom skríningu 15 druhov mangrovníkov sa zistilo, že petroléterový extrakt z koreňov mangrovníkov je najúčinnejší proti Culex quinquefasciatus s hodnotou LC50 25,7 mg/l [66].Synergický účinok tohto extraktu a botanického insekticídu pyretrum bol tiež hlásený na zníženie LC50 pyrethra proti larvám C. quinquefasciatus z 0,132 mg/l na 0,107 mg/l, okrem toho sa v tejto štúdii použil výpočet SF 1,23.34,35,44].Bola hodnotená kombinovaná účinnosť extraktu z koreňa citrónovníka Solanum a niekoľkých syntetických insekticídov (napr. fenthion, cypermetrin (syntetický pyretroid) a timethphos (organofosforový larvicíd)) proti komárom rodu Anopheles.Stephensi [54] a C. quinquefasciatus [34].Kombinované použitie cypermetrínu a petroléterového extraktu žltého ovocia ukázalo synergický účinok na cypermetrín vo všetkých pomeroch.Najúčinnejším pomerom bola binárna kombinácia 1:1 s hodnotami LC50 a SF 0,0054 ppm a 6,83 v porovnaní s An.Stephen West[54].Zatiaľ čo 1:1 binárna zmes S. xanthocarpum a temephos bola antagonistická (SF = 0,6406), kombinácia S. xanthocarpum-fention (1:1) vykazovala synergickú aktivitu proti C. quinquefasciatus s SF 1,3125 [34]].Tong a Blomquist [35] skúmali účinky rastlinného etylénoxidu na toxicitu karbarylu (širokospektrálny karbamát) a permetrínu pre komáre rodu Aedes.Aedes aegypti.Výsledky ukázali, že etylénoxid z agaru, čierneho korenia, borievky, helichrysum, santalového dreva a sezamu zvýšil toxicitu karbarylu pre komáre rodu Aedes.Hodnoty aegypti larvae SR sa pohybujú od 1,0 do 7,0.Na rozdiel od toho žiadny z EO nebol toxický pre dospelých komárov rodu Aedes.V tomto štádiu neboli hlásené žiadne synergické účinky pre kombináciu Aedes aegypti a EO-karbarylu.PBO sa použil ako pozitívna kontrola na zvýšenie toxicity karbarylu proti komárom rodu Aedes.Hodnoty SR lariev Aedes aegypti a dospelých jedincov sú 4,9-9,5 a 2,3.Na larvicídnu aktivitu sa testovali iba binárne zmesi permetrínu a EO alebo PBO.Zmes EO-permetrínu mala antagonistický účinok, zatiaľ čo zmes PBO-permetrínu mala synergický účinok proti komárom rodu Aedes.Larvy Aedes aegypti.Experimenty s odozvou na dávku a hodnotenie SR pre zmesi PBO-permetrínu však ešte neboli vykonané.Aj keď sa dosiahlo málo výsledkov týkajúcich sa synergických účinkov fytosyntetických kombinácií proti vektorom komárov, tieto údaje podporujú existujúce výsledky, ktoré otvárajú vyhliadky na pridanie synergistov nielen na zníženie aplikovanej dávky, ale aj na zvýšenie účinku zabíjania.Účinnosť hmyzu.Okrem toho výsledky tejto štúdie po prvýkrát preukázali, že oleje C. rotundus a A. galanga synergicky vykazujú výrazne vyššiu účinnosť proti kmeňom komárov rodu Aedes citlivým na pyretroidy a rezistentným na pyretroidy v porovnaní s PBO v kombinácii s toxicitou permetrínu.Aedes aegypti.Neočakávané výsledky zo synergickej analýzy však ukázali, že olej C. verum mal najväčšiu aktivitu proti dospelým jedincom proti obom kmeňom Aedes.Toxický účinok permetrínu na Aedes aegypti bol prekvapivo neuspokojivý.Rozdiely v toxických a synergických účinkoch môžu byť čiastočne spôsobené vystavením rôznym typom a úrovniam bioaktívnych zložiek v týchto olejoch.
Napriek snahe pochopiť, ako zlepšiť efektívnosť, synergické mechanizmy zostávajú nejasné.Možné dôvody rozdielnej účinnosti a synergického potenciálu môžu zahŕňať rozdiely v chemickom zložení testovaných produktov a rozdiely v citlivosti komárov spojenú so stavom a vývojom rezistencie.Existujú rozdiely medzi hlavnými a minoritnými zložkami etylénoxidu testovanými v tejto štúdii a ukázalo sa, že niektoré z týchto zlúčenín majú repelentné a toxické účinky proti rôznym škodcom a prenášačom chorôb [61,62,64,67,68].Avšak hlavné zlúčeniny charakterizované v olejoch C. rotundus, A. galanga a C. verum, ako je cypern, β-bisabolén a cinnamaldehyd, neboli v tomto článku testované na ich anti-dospelé a synergické účinky proti Ae, v tomto poradí.Aedes aegypti.Preto sú potrebné budúce štúdie na izoláciu aktívnych zložiek prítomných v každom esenciálnom oleji a na objasnenie ich insekticídnej účinnosti a synergických interakcií proti tomuto vektoru komárov.Vo všeobecnosti insekticídna aktivita závisí od pôsobenia a reakcie medzi jedmi a tkanivami hmyzu, čo možno zjednodušiť a rozdeliť do troch štádií: prienik do pokožky tela hmyzu a membrán cieľových orgánov, aktivácia (= interakcia s cieľom) a detoxikácia.toxické látky [57, 69].Preto synergizmus insekticídov, ktorý vedie k zvýšenej účinnosti kombinácií toxických látok, vyžaduje aspoň jednu z týchto kategórií, ako je zvýšená penetrácia, väčšia aktivácia nahromadených zlúčenín alebo menej znížená detoxikácia pesticídne aktívnej zložky.Napríklad energetická tolerancia oneskoruje prienik kutikuly cez zhrubnutú kutikulu a biochemickú odolnosť, ako je zvýšený metabolizmus insekticídov pozorovaný u niektorých rezistentných kmeňov hmyzu [70, 71].Významná účinnosť EO pri zvyšovaní toxicity permetrínu, najmä proti PMD-R, môže naznačovať riešenie problému rezistencie na insekticídy prostredníctvom interakcie s mechanizmami rezistencie [57, 69, 70, 71].Tong a Blomquist [35] podporili výsledky tejto štúdie preukázaním synergickej interakcie medzi EO a syntetickými pesticídmi.aegypti, existujú dôkazy o inhibičnej aktivite proti detoxikačným enzýmom, vrátane cytochrómových P450 monooxygenáz a karboxylesteráz, ktoré sú úzko spojené s rozvojom rezistencie voči tradičným pesticídom.PBO nie je len metabolickým inhibítorom monooxygenázy cytochrómu P450, ale tiež zlepšuje penetráciu insekticídov, čo dokazuje jeho použitie ako pozitívna kontrola v synergických štúdiách [35, 72].Je zaujímavé, že 1,8-cineol, jedna z dôležitých zložiek nachádzajúcich sa v galangalovom oleji, je známy svojimi toxickými účinkami na druhy hmyzu [22, 63, 73] a uvádza sa, že má synergické účinky v niekoľkých oblastiach výskumu biologickej aktivity [ 74]..75, 76, 77].Okrem toho 1,8-cineol v kombinácii s rôznymi liekmi vrátane kurkumínu [78], 5-fluóruracilu [79], kyseliny mefenamovej [80] a zidovudínu [81] má tiež účinok podporujúci permeáciu.in vitro.Možná úloha 1,8-cineolu v synergickom insekticídnom pôsobení teda nespočíva len ako aktívna zložka, ale aj ako zosilňovač penetrácie.V dôsledku väčšieho synergizmu s permetrínom, najmä proti PMD-R, môžu synergické účinky galangalového oleja a trichosanthesového oleja pozorované v tejto štúdii vyplývať z interakcií s mechanizmami rezistencie, tj zo zvýšenej permeability pre chlór.Pyretroidy zvyšujú aktiváciu nahromadených zlúčenín a inhibujú detoxikačné enzýmy, ako sú cytochróm P450 monooxygenázy a karboxylesterázy.Tieto aspekty si však vyžadujú ďalšiu štúdiu na objasnenie špecifickej úlohy EO a jeho izolovaných zlúčenín (samotných alebo v kombinácii) v synergických mechanizmoch.
V roku 1977 boli zaznamenané zvyšujúce sa úrovne rezistencie voči permetrínu v hlavných populáciách vektorov v Thajsku a počas nasledujúcich desaťročí bolo používanie permetrínu do značnej miery nahradené inými pyretroidnými chemikáliami, najmä tými, ktoré boli nahradené deltametrínom [82].Rezistencia vektorov na deltametrín a iné triedy insekticídov je však extrémne bežná v celej krajine v dôsledku nadmerného a pretrvávajúceho používania [14, 17, 83, 84, 85, 86].Na boj proti tomuto problému sa odporúča striedať alebo opätovne používať vyradené pesticídy, ktoré boli predtým účinné a menej toxické pre cicavce, ako je permetrín.V súčasnosti, hoci sa používanie permetrínu v nedávnych národných vládnych programoch na kontrolu komárov znížilo, v populáciách komárov možno stále nájsť rezistenciu voči permetrínu.Môže to byť spôsobené vystavením komárov komerčným produktom na kontrolu domácich škodcov, ktoré pozostávajú najmä z permetrínu a iných pyretroidov [14, 17].Úspešné opätovné využitie permetrínu si teda vyžaduje vývoj a implementáciu stratégií na zníženie rezistencie vektorov.Hoci žiadny z esenciálnych olejov testovaných jednotlivo v tejto štúdii nebol taký účinný ako permetrín, spolupráca s permetrínom viedla k pôsobivým synergickým účinkom.Toto je sľubná indikácia, že interakcia EO s mechanizmami rezistencie vedie k tomu, že kombinácia permetrínu s EO je účinnejšia ako insekticíd alebo samotný EO, najmä proti PMD-R Ae.Aedes aegypti.Výhody synergických zmesí pri zvyšovaní účinnosti, napriek použitiu nižších dávok na kontrolu vektorov, môžu viesť k zlepšeniu manažmentu rezistencie a zníženiu nákladov [33, 87].Z týchto výsledkov je príjemné poznamenať, že EO z A. galanga a C. rotundus boli významne účinnejšie ako PBO pri synergizácii permetrínovej toxicity v kmeňoch MCM-S aj PMD-R a sú potenciálnou alternatívou k tradičným ergogénnym pomôckam.
Vybrané EO mali významné synergické účinky pri zvyšovaní toxicity pre dospelých proti PMD-RAe.aegypti, najmä galangalový olej, má hodnotu SR až 1233,33, čo naznačuje, že EO má široký prísľub ako synergista pri zvyšovaní účinnosti permetrínu.To môže stimulovať používanie nového aktívneho prírodného produktu, čo by spolu mohlo zvýšiť používanie vysoko účinných produktov na kontrolu komárov.Odhaľuje tiež potenciál etylénoxidu ako alternatívneho synergistu na účinné zlepšenie starších alebo tradičných insekticídov na riešenie existujúcich problémov s rezistenciou v populáciách komárov.Používanie ľahko dostupných rastlín v programoch na kontrolu komárov nielen znižuje závislosť od dovážaných a drahých materiálov, ale tiež stimuluje miestne snahy o posilnenie systémov verejného zdravotníctva.
Tieto výsledky jasne ukazujú významný synergický účinok produkovaný kombináciou etylénoxidu a permetrínu.Výsledky poukazujú na potenciál etylénoxidu ako rastlinného synergistu pri kontrole komárov, čím sa zvyšuje účinnosť permetrínu proti komárom, najmä v rezistentných populáciách.Budúci vývoj a výskum si budú vyžadovať synergickú bioanalýzu galangalových a alpínskych olejov a ich izolovaných zlúčenín, kombinácie insekticídov prírodného alebo syntetického pôvodu proti viacerým druhom a štádiám komárov a testovanie toxicity proti necieľovým organizmom.Praktické využitie etylénoxidu ako životaschopného alternatívneho synergistu.
Svetová zdravotnícka organizácia.Globálna stratégia prevencie a kontroly horúčky dengue na roky 2012–2020.Ženeva: Svetová zdravotnícka organizácia, 2012.
Weaver SC, Costa F., Garcia-Blanco MA, Ko AI, Ribeiro GS, Saade G. a kol.Vírus Zika: história, vznik, biológia a vyhliadky na kontrolu.Antivírusový výskum.2016;130:69–80.
Svetová zdravotnícka organizácia.Prehľad o horúčke dengue.2016. http://www.searo.who.int/entity/vector_borne_tropical_diseases/data/data_factsheet/en/.Dátum prístupu: 20. január 2017
Ministerstvo verejného zdravotníctva.Aktuálny stav prípadov horúčky dengue a hemoragickej horúčky dengue v Thajsku.2016. http://www.m-society.go.th/article_attach/13996/17856.pdf.Dátum prístupu: 6. januára 2017
Ooi EE, Goh CT, Gabler DJ.35 rokov prevencie horúčky dengue a kontroly vektorov v Singapure.Náhle infekčné ochorenie.2006;12:887–93.
Morrison AC, Zielinski-Gutierrez E, Scott TW, Rosenberg R. Identifikujte výzvy a navrhnite riešenia na kontrolu vírusových vektorov Aedes aegypti.Medicína PLOS.2008;5:362–6.
Centrá pre kontrolu a prevenciu chorôb.Horúčka dengue, entomológia a ekológia.2016. http://www.cdc.gov/dengue/entomologyecology/.Dátum prístupu: 6. januára 2017
Ohimain EI, Angaye TKN, Bassey SE Porovnanie larvicídnej aktivity listov, kôry, stoniek a koreňov Jatropa curcas (Euphorbiaceae) s prenášačom malárie Anopheles gambiae.SZhBR.2014;3:29-32.
Soleimani-Ahmadi M, Watandoust H, Zareh M. Charakteristiky biotopu lariev Anopheles v oblastiach malárie programu na eradikáciu malárie v juhovýchodnom Iráne.Asia Pacific J Trop Biomed.2014;4(Suppl 1):S73–80.
Bellini R, Zeller H, Van Bortel W. Prehľad prístupov ku kontrole vektorov, prevencii a kontrole prepuknutia vírusu západného Nílu a výziev, ktorým Európa čelí.Vektor parazitov.2014;7:323.
Muthusamy R., Shivakumar MS Selekcia a molekulárne mechanizmy rezistencie na cypermetrín u húseníc červených (Amsacta albistriga Walker).Biochemická fyziológia škodcov.2014;117:54–61.
Ramkumar G., Shivakumar MS Laboratórna štúdia permetrínovej rezistencie a skríženej rezistencie Culex quinquefasciatus na iné insekticídy.Výskumné centrum Palastor.2015;114:2553–60.
Matsunaka S, Hutson DH, Murphy SD.Pesticide Chemistry: Human Welfare and the Environment, Vol.3: Mechanizmus účinku, metabolizmus a toxikológia.New York: Pergamon Press, 1983.
Chareonviriyaphap T, Bangs MJ, Souvonkert V, Kongmi M, Korbel AV, Ngoen-Klan R. Prehľad rezistencie na insekticídy a behaviorálneho vyhýbania sa vektorom ľudských chorôb v Thajsku.Vektor parazitov.2013;6:280.
Chareonviriyaphap T, Aum-Aung B, Ratanatham S. Súčasné vzory rezistencie na insekticídy medzi vektormi komárov v Thajsku.Verejné zdravie v juhovýchodnej Ázii J Trop Med.1999;30:184-94.
Chareonviriyaphap T, Bangs MJ, Ratanatham S. Stav malárie v Thajsku.Verejné zdravie v juhovýchodnej Ázii J Trop Med.2000;31:225–37.
Plernsub S, Saingamsuk J, Yanola J, Lumjuan N, Thippavankosol P, Walton S, Somboon P. Dočasná frekvencia mutácií F1534C a V1016G knockdown rezistencie u komárov Aedes aegypti v Chiang Mai, Thajsko a vplyv mutácií na účinnosť sprejov tepelnou hmlou obsahujúce pyretroidy.Aktatrop.2016;162:125–32.
Vontas J, Kioulos E, Pavlidi N, Moru E, Della Torre A, Ranson H. Odolnosť voči insekticídom v hlavných vektoroch horúčky dengue Aedes albopictus a Aedes aegypti.Biochemická fyziológia škodcov.2012;104:126–31.
Čas odoslania: júl-08-2024